【摘要】 在某些方面,拉曼光谱比红外光谱更难处理样品。在前者中,样品的纯度和均匀性通常必须比后者得到更好的控制。

在某些方面,拉曼光谱比红外光谱更难处理样品。在前者中,样品的纯度和均匀性通常必须比后者得到更好的控制。

另一方面,通常由玻璃制成的拉曼光谱样品池更容易使用水溶液。

粉末可以直接从表面散射取样,也可以装在熔点毛细管中,水平或垂直照射。小晶体可以装在毛细管中进行取样。如果晶体足够大,可以直接在激光束中进行取样。(我们将参考的大部分工作将是激光拉曼光谱。)

对于固体材料,不必研磨样品,从而破坏其完整性。样品厚度不是问题,因为拉曼光谱本质上类似于发射过程,而不是吸收现象。拉曼光谱中取样的一个问题是当样品暴露于激光激发时可能产生的荧光。例如,氩离子激光器的缺点在于,较短波长激发产生荧光和样品分解的可能性较大。然而,使用He-Ne激光源(红色激发),Lord和Yu-TM在检测溶菌酶及其组成氨基酸时未发现严重的荧光问题。有时,在生物化学物质的拉曼光谱中看到的荧光不是由材料本身引起的,而是由有机杂质引起的。这些杂质通常通过长时间接触源而“去除”。通过活性炭处理,商业样品有时在光谱上可接受。在填充样品池之前,通过烧结玻璃盘过滤溶液或离心,可最大限度地减少因灰尘、悬浮物质、胶体、气泡或其他粒径约等于或大于激发波长的未溶解物质引起的廷德尔散射。应避免样品对激发波长的吸收和该波长引起的荧光,因为这些过程使得难以获得足够的拉曼光谱。此外,应优化条件以获得尽可能强的拉曼散射,因为拉曼效应基本上是一种弱现象。Bailey等人4~和Hawes等人4~描述了激发相对少量样品的几种空间排列,这些排列产生了有效的散射。

拉曼分光光度计本质上是“单光束”仪器,因此,与红外双光束仪器不同,它们不能用于差分光谱,以补偿溶剂和杂质等物质的拉曼散射。为了补偿溶剂,必须采用早期单光束红外仪器使用的方法:从溶液光谱中减去溶剂光谱,每个光谱分别测定。

 

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