【摘要】 高效液相色谱固定相是HPLC技术的核心,直接决定着柱效和分离度。

高效液相色谱固定相是HPLC技术的核心,直接决定着柱效和分离度。常用的HPLC色谱柱固定相包括硅胶和化学键和固定相。其中,硅胶固定相包括无定形全多孔硅胶、球形全多孔硅胶、灌注微粒球形硅胶、表面多孔硅胶、硅-碳杂化硅胶以及硅聚合薄膜型硅胶。

 

无定形全多孔硅胶柱效可达2*10^4-5*10^4/m,其载样量大,可作为分析柱和制备柱的固定相,也可作为载体使用,价格便宜,但相对的,涡流扩散项大及柱渗透性差。

 

球形全多孔硅胶除具有上述硅胶优点外,具有涡流扩散项小及柱渗透性好的优点。柱效高达8*10^4/m,该种类型硅胶应用范围最广,是目前最常用的高效液相商品色谱柱。

 

灌注微粒球形硅胶属于球形全多孔硅胶的一种,球形硅胶内具有400-800 nm的贯穿孔,贯穿孔网络中还有较小的内联孔(30-100 nm)。该硅胶具有快速传质的动力学性能,适用于大分子的分离与制备。流速较快时,该硅胶通过对流和传质的协同效应减少峰展。

 

表面多孔硅胶又称表面多孔填料,它具有一个较小的实心核和覆盖在核外的多孔硅胶层,因其实心核不参与扩散,使得该种硅胶的柱效得以提高。除此之外,它产生的反压小,不易堵塞,可在较好的分离度基础上,提高流动相流速并加快分析速率。

 

硅-碳杂化硅胶的内部和表面都具有碳硅键,极大增强化学稳定性。例如C8和C18色谱柱,适用性高,还可用于LC-MS。

 

硅聚合薄膜型硅胶是通过气相沉积法在超纯硅表面包裹一层均匀且致密的硅聚合物薄膜。这使得硅胶完全遮挡住残余的硅羟基并增加了机械强度和pH适用范围。该种硅胶可消除样品分子与硅羟基作用,避免拖尾现象。

 

【1】张祥民. 现代色谱分析[M]. 复旦大学出版社, 2004.

【2】傅若农, 顾峻岭. 近代色谱分析[M]. 国防工业出版社, 1998.

【3】刘克玲. 实用仪器分析[J]. 国外科技新书评介, 2014(8):1.

 

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