等温滴定量热仪（ITC）

等温滴定量热仪，型号VP-ITC，英国马尔文仪器有限公司，温度范围2-80℃，样品池体积1.4mL，滴定针体积290微升，可测定分子间相互作用的热力学参数。

1.样品性质要求：(1)滴定液(滴定针中)：透明均匀液体，无肉眼可见沉淀不能为悬浮液，或随时间或温度变化有固体析出；(2)被滴定液(池体中)：最好为透明均匀液体，可为悬浮液，但颗粒不能过大(纳微级尚可接受)；(3)滴定过程中避免大量沉淀产生或粘度改变；(4)滴定液和被滴定液pH最好一致，相差最大不能超过0.2pH单位；

2.样品浓度说明：(1)以摩尔浓度(mM)为标准，一般滴定液是被滴定液的10-20倍，如有参考文献可以参考文献浓度为参照；(2)绝对浓度可以相关参考文献为参照，若无参考文献，对于小分子和蛋白相互作用体系可配制为小分子溶液200µM、蛋白溶液20µM；小分子和小分子之间确认为弱相互作用的体系，滴定针中的小分子溶液可配制为mM级，池体中溶液浓度可参照(1)的浓度比例配制；

3.样品体积要求：一组样品测试包含滴定液(小分子)和被滴定液(蛋白或大分子)之间以及滴定液和溶剂之间的相互作用，所以滴定液和被滴定液为5mL，缓冲液可准备10mL；若增加滴定的小分子种类，则被滴定液和缓冲液体积则相应增加，同理增加被滴定液种类，则滴定液和缓冲液体积相应增加；推荐按测试组准备样品；