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      菌株及载体构建服务

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      菌株及载体构建服务

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      项目简介

      一、项目介绍

      菌株构建是采用基因工程技术方法对原始或者野生型菌株进行基因改造,涉及载体构建、菌株转化,筛选目标菌株和目的菌株改造证明等实验步骤,可以根据客户实验需求,设计实验方案。

      基因是探究细菌结构和功能的基础,因此利用基因敲除技术验证细菌基因的功能一直是研究的热点。 

      细菌基因敲除的方法主要包括以下几种:

      1.基因编辑技术(如CRISPR/Cas9):利用特定的酶来切割和修改DNA序列,以删除或修改目标基因。

      2.同源重组:将目标基因的上下游同源臂及筛选标记基因构建至合适载体中,然后将载体导入细菌胞内,使目标基因被替换或删除。

      3.化学诱变:用化学物质处理细菌,使其基因发生突变,从而破坏该基因的功能。

      4.转座子:利用转座子元件将外源DNA插入到宿主基因组中,从而破坏该基因的功能。

      5.突变积累:将细菌培养在一系列条件下,让细菌自行发生突变,最终筛选出具有目标基因缺失或变异的菌株。

      二、交付内容

      1. 已经验证成功的载体;

      2. 已经验证成功的目的菌株;

      3. 实验报告及测序正确的验证结果。

       

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      结果展示

      案例展示:https://drive.weixin.qq.com/s?k=AO0AWwf-AAwpNCt8bq(点击查看)。

      图1 扩增敲除菌与野生菌PCR鉴定图(条带1为敲除菌株,2为野生菌株)

      图2-1 绿色质粒图谱

      图2-2  标记菌株 470nm  蓝光灯下观察荧光图

       

      样品要求

      请按照送样单填写相关信息,并和指南针工作人员沟通确认即可。

      可承接菌株列表:

      假单胞菌

      链球菌

      肺炎克雷伯菌

      乳酸菌

      肠杆菌

      金黄色葡萄球菌

      幽门螺旋杆菌

      芽孢杆菌

      鲍曼不动杆菌

      谷氨酸棒状杆菌

      脆弱拟杆菌

      具核梭杆菌

      牙龈卟啉单胞菌

      其他革兰氏阳性菌

      大部分革兰氏阴性菌

      因篇幅原因其他细菌定制突变体文库请具体咨询

      相关资料

      1672673342107_XX基因敲除(敲入)实验报告模板-2022.docx
      干货
      1672673379114_荧光标记报告模板-2022.docx
      干货
      s41598-018-32880-7.pdf
      书籍
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