生物测试

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      刘老师

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      酶联免疫吸附(ELISA)测试

      内容简介

      ELISA介绍

      ELISA实验是采用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接,然后通过酶与底物产生颜色反应,用于定量测定。测定的对象可以是抗体也可以是抗原。

      在这种测定方法中有3种必要的试剂:1.固相的抗原或抗体(免疫吸附剂)2.酶标记的抗原或抗体(标记物)3.酶作用的底物(显色剂)

      测量时,抗原(抗体)先结合在固相载体上,但仍保留其免疫活性,然后加一种抗体(抗原)与酶结合成的偶联物(标记物),此偶联物仍保留其原免疫活性与酶活性,当偶联物与固相载体上的抗原(抗体)反应结合后,再加上酶的相应底物,即起催化水解或氧化还原反应而呈颜色。

      其所生成的颜色深浅与欲测的抗原(抗体)含量成正比。用分光光度计(酶标仪)加以测定。其方法简单,方便迅速,特异性强。

      测试过程(以试剂盒为例)

      1.    加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

      2.    温育:用封板膜封板后置 37温育30分钟。

      3.    配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备。

      4.    洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

      5.    加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

      6.    显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37避光显色10 分钟。

      7.    终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)

      8.    测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。

      结果展示

      提供:

      1. 原始数据;

      2. 简单数据处理和绘图;

      3. 下图为测试后的结果绘图。

      image.png

      服务说明

      样品准备要求

      1.所检测蛋白测试的试剂盒(也可以由公司代购);

      2.所检测的样品;

      3.请打印预约单;



      1·提交需求

      在下方下载并填写测试单,描述越清楚,沟通越高效。

      2·沟通细节

      我们的项目经理会与您沟通确认方案,包括报价、周期和注意事项等。

      3·付款确认

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      4·下载结果

      实验完成后您会收到提醒,可登录网站个人中心下载实验结果。
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