生物扫描电镜(SEM)
生物SEM介绍
生物扫描电镜,用于拍摄提供材料的表面三维形貌情况,拍摄照片为黑白照片;一般用来观察细胞外表面的变形以及受损情况等,也可以观察材料在细胞表面的分布情况。
样品前处理方法
您仅需做到这一步即可送样
收集细胞/植物组织取样,用2.5%的戊二醛溶液4℃固定过夜,一般12h左右;
下列步骤由我们完成
倒掉固定液,用0.1M,pH7.0的磷酸缓冲液漂洗样品三次,每次15min;
用1%的锇酸溶液固定样品1-2h;
小心取出锇酸废液,用0.1M,pH7.0的磷酸缓冲液漂洗样品三次,每次15min;
用梯度浓度(包括30%,50%,70%,80%,90%和95%五种浓度)的乙醇溶液对样品进行脱水处理,每种浓度处理15min,再用100%的乙醇处理两次,每次20 min;
用乙醇与醋酸异戊酯的混合液(V/V=1/1)处理样品30min,再用纯醋酸异戊酯处理样品1h或放置过夜;
临界点干燥。镀膜,观察。处理好的样品在扫描电镜中观察。
需要您提供
1.2.5%戊二醛固定后的样本;
2.打印填写好的送样单。
(a) (b) (c)
(a)和(b)是真菌的菌丝和分生孢子图,(c)是材料表面大肠杆菌的附着图。
样品准备要求:
1.对于细胞类,106以上的细胞,用细胞刮刀刮下来,1500-3000转离心,5-10min,收集细胞于1.5ml或2ml离心管,管底肉眼可见2-3粒大米状样品,如果细胞量很多,把细胞团块用细针尖挑成几个小团块,弃上清,沿管壁缓慢加入4℃预冷的固定液,固定液完全浸没样品,然后放入4°C冰箱过夜。
2.对于组织类,新鲜取材,取材位置准确,组织大小尽量在1-2mm³,离体取材后请尽快投入4℃预冷的固定液中,固定液完全浸没组织,然后放入4°C冰箱过夜。
3.对于细菌类,吸取OD0.5-0.8的培养物,离心后弃培养基,收集菌体沉淀于管底黄豆大小,可以用PBS洗1-2次,齐上清,沿管壁缓慢加入4℃预冷的固定液,固定液完全浸没样品,然后放入4°C冰箱过夜。
*固定液的量请参考上图,加至箭头所示位置
4.拍摄8-10张照片,结果反馈请在测试完成一周内,超过一周样本会被处理掉。
1·提交需求
2·沟通细节
3·付款确认
4·下载结果
下载
请您下载“生物扫描电镜(SEM)·测试单”,详细填写后上传
下单中有任何问题可联系周老师:18008426011(同微信)